Establishment and application of TAS-ELISA for the detection of M. rosenbergii Nodavirus
罗氏沼虾诺达病毒TAS-ELISA检测法的建立及应用研究

罗氏沼虾肌肉白浊痛（Whitish muscle diseases of Macrobrachium rosenbergii）是近年来流行于罗氏沼虾苗种阶段的严重疾病，该病痛原已确定为罗氏沼虾诺达病毒（Macrobrachium rosenbergii Nodavirus，MrNV）．作者在病毒超离提纯的基础上，制备了罗氏沼虾诺达病毒兔抗血清，并应用抗罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体2135，建立了三抗体夹心酶联免疫检测方法（TAS-ELISA）．TAS-ELISA最适反应条件为：兔抗体以1μg／mL包板，小鼠单抗2B5的工作浓度为1：50000，该法检测MrNV的灵敏度达0．98ng，对WSSV、TSV及其他细菌感染死亡的罗氏沼虾苗没有非特异性反应．通过对2000-2002年病虾及疑似病虾的病毒检测，表明TAS—ELISA法比间接ELISA法和核酸电泳法有更高的阳性检出率和符合率；此外还摸索了降低孵育温度和缩短孵育时间对病毒检测的影响，表明各步孵育温度和时间分别为25℃和20min对于白浊症状的痛苗检测无明显影响，使得本法更加适合于生产实践。