Studies on cold-induced apoptosis in Colossoma brachypomum cells
低温诱导淡水白鲳细胞凋亡的研究

为探讨10℃低温导致淡水白鲳尾蜡细胞系CBT死亡的原因及其可能机制．采用CCK8试剂盒法检测细胞存活率，荧光染料H2DCFDA染色测定细胞内活性氧（ROS）含量，亚二倍体峰和Tunel分析检测细胞凋亡，琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段分析，Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态变化，比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）释放率．结果表明随CBT细胞受10℃低温作用时间的延长，细胞存活率显著下降，细胞内ROS含量和LDH释放率显著增加（P〈0．01）．低温处理3d的CBT细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰，凋亡率为13％．再经32℃复温12h后，琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带；Tunel检测，低温处理3、4和5d的CBT细胞分别有23.49％，27．72％和35．10％发生凋亡．低温处理5d的CBT细胞核分裂成多个小核，呈现出典型的凋亡小体．因此10℃低温能诱导CBT细胞凋亡．ROS参与了10℃低温致CBT细胞损伤及凋亡过程．