枯草杆菌(Bacillus subtilis)pur操纵子调控区内PurBox1突变对细胞内受腺嘌呤调节的基因表达的影响

枯草杆菌的嘌呤阻抑蛋白(PurR)通过与pur操纵子调控区DNA的相互作用来抑制该操纵子的转录.pur操纵子的调控区中有两个PurBox序列,它是PurR高效结合所必需的.位于上游的PurBox1(-81～-68,核苷酸定位是以转录起始点为+1)结合力较强,下游的PurBox2(-49～-36)结合力较弱.我们构建了3个PurBox1突变体,离体测定了突变对PurR-pur操纵子调控区DNA结合的影响,也测定了突变对细胞内pur操纵子表达调控的影响.结果表明,突变使体外的PurR-pur操纵子调控区DNA间结合的能力显著地下降;在G-75A,G-75T和缺失5个核苷酸的△5这3个突变菌株中,体内腺嘌呤对pur操纵子的阻抑调节也受到了严重的影响.此外,细胞内PurR滴定的方法也用来证明了连着PurBox1和PurBox2上下游的一些DNA顺序是PurR与操纵基因结合所必需的.