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中国科学 生命科学 2005
顺铂作用卵巢癌细胞株的蛋白质组学研究Abstract: 应用蛋白质组学技术观察顺铂作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后蛋白质分子的表达差异,探讨蛋白质组学方法在化疗药物抗肿瘤作用机制研究方面的应用.用顺铂(6mg/mL)作用人卵巢癌SKOV3细胞6h,分别收集实验组与对照组细胞,裂解并提取细胞内总蛋白;以固相IPG胶条(17cm,pH4~7)为载体,进行第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳,得到实验组与对照组双向电泳凝胶图;经考马斯亮蓝染色后,在PDQuest软件的辅助下进行实验组与对照组蛋白质表达的比较,选择并切取明显差异点共11个,经肽质量指纹谱(PMF)和串级质谱(MS/MS)分析,检测出差异点中包含的主要蛋白.通过质谱分析显示,顺铂处理后表达明显上调的有原肌球蛋白家族、肌动蛋白家族、热休克蛋白60(HSP60)、磷酸丙糖异构酶(TIM)家族等;表达下调的有烯醇酶家族等.这几类蛋白质多参与细胞内能量代谢、细胞形态维持、细胞转化凋亡等生理过程,提示顺铂的抗肿瘤机制可能与此有关.
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