沙眼衣原体质粒蛋白pORF5核酸疫苗抗衣原体生殖道感染免疫保护作用

探讨沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白核酸疫苗免疫保护效果,及分析其可能的免疫保护机制,以确定pORF5在Ct疫苗研制中的应用价值.构建pORF5核酸疫苗,建立Ct感染小鼠模型,并在该模型中评价pORF5核酸疫苗抗Ct感染效果.运用细胞培养法检测Ct清除率及定植量的改变,ELISA法分析脾淋巴细胞IFN-γ和IL-4产生水平及小鼠血清及生殖道局部抗体产生情况;HE染色法分析输卵管病理组织变化;MTT法分析脾淋巴细胞增殖.结果经鼻黏膜3次免疫后,pORF5核酸疫苗组在Ct感染后第24天其清除率为100%,显著高于pcDNA3.1,PBS对照组(P<0.01),定植密度明显低于对照组(P<0.01),仅在pORF5核酸疫苗组小鼠血清及生殖道中检测到了特异性抗体,产生的抗体亚类分别以IgG2a,IgA为主;免疫组小鼠脾淋巴细胞产生IFN-γ及刺激指数均明显高于pcDNA3.1,PBS对照组(P<0.01),但产生IL-4的水平均较低.pORF5核酸疫苗组小鼠输卵管解剖结构基本正常,而pcDNA3.1,PBS组小鼠输卵管壶腹部、峡部肿胀,管壁血管扩张充血,单侧或双侧发生不同程度扭曲变形积水.这些资料显示pORF5核酸疫苗可诱导小鼠产生明显的抗Ct保护效应,其可能的免疫保护机制包括诱导Th1型为主的细胞免疫应答及高效价的特异性抗体的产生,提示pORF5核酸疫苗具有潜在的疫苗研究与开发价值.