骨髓间充质干细胞亲和肽MMP底物肽复合物的构建及其作为小分子药物载体的初步研究

为了探讨骨髓间充质干细胞亲和肽与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)底物肽复合后作为小分子药物载体的可行性,采用噬菌体肽库技术,用分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,MSCs)筛选噬菌体环七肽库,获得MSCs高亲和性多肽.合成FITC(FITC-CSTNPKVLC,FITC-P1)和生物素(Biotin-CSTNPKVLC,Bio-P1)标记的亲和肽,流式细胞术和ELISA方法检测其与MSCs的亲和性;将DAPI标记的MSC-Bio-P1复合物植入裸鼠肿瘤组织周围,检测复合物在体内的稳定性.将亲和肽与基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)特异性底物肽(GPLGIAGQ)连接,合成FITC标记的亲和肽-底物肽复合物(FITC-Ahx-CSTNPKVLCGPLGIAGQ,FITC-P1-P2),通过流式细胞术检测其对MSCs的亲和性,毛细管电泳方法检测MMP对FITC-P1-P2的酶切效果.结果表明,通过噬菌体肽库筛选获得的MSCs亲和肽,在体内外对MSCs均具有良好的亲和性和稳定性...