中华鲟生长激素受体的分子克隆和功能分析

为研究生长激素对中华鲟生长的调控机制, 克隆了中华鲟生长激素受体cDNA. csGHR cDNA的可读框编码了611个氨基酸残基的跨膜蛋白质, 含有GHR的所有特征结构域. 序列对比发现其他种属GHR中高度保守的氨基酸残基在csGHR中发生了替换. 我们利用CHO细胞分析了csGHR的生物功能和csGHR分子中高度保守性氨基酸残基替换的生物意义. csGHR稳定表达细胞中共转染的受丝氨酸蛋白酶抑制剂2.1(Spi 1.2)启动子驱动的荧光素酶报告基因受海鲤生长激素(seabream GH, sbGH)诱导表达, 并且sbGH诱导稳定表达细胞显著增殖. csGHR稳定表达细胞培养液中检测到中华鲟生长激素结合蛋白质, 并且csGHBP的生成需要金属蛋白酶活性的参与. csGHR配体结合域的Asp突变为Glu显著提高csGHR介导的上述生物活性, 而Asp突变为Ala则明显降低csGHR的生物活性. 这些结果表明, 克隆的csGHR具有完全生物功能, 并且csGHBP可能通过csGHR蛋白酶解而生成. 这些发现将有助于全面了解中华鲟生长调控机制.