抗牛PrP多肽单克隆抗体的制备及其在牛PrP 检测中的应用

为获得广谱抗哺乳类动物PrP单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),用牛朊蛋白(prion protein,PrP)多肽(209~228aa)与匙孔槭血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联物免疫Balb/C小鼠.经细胞融合和克隆后获得针对上述多肽的杂交瘤细胞株.分别用Western blot和免疫组化(immunohis tochemistry,IHC)的方法检测这些McAbs与重组人(human,Hu)、牛(bovine,Bo)、仓鼠(hamster,Ha)PrP蛋白、牛脑组织中的正常朊蛋白(cellular PrP,PrPc)和致病性朊蛋白(scrapie of prion,PrPSc)的反应性.本文为制备高效价抗PrP McAb提供了一个简单、易行的方法.制备的抗体可用于研究哺乳类PrP生物学特性,检测可传播性海绵样脑病,特别是对牛海绵样脑病的诊断具有重要意义.