|
遗传 2003
RNA Responsible for Conferring a DNase I Sensitive Structure on Albumin Gene in Assembled Chromatin
|
Abstract:
同样的基因在不同的分化细胞中表达不同,基因的选择性表达问题涉及分化和衰老的本质,转录基因对DNase I(DNA酶I)消化敏感,本文研究了RNA对小鼠重组染色质白蛋白基因DNase I消化敏感性的影响,分离BALB/c小鼠脑细胞核,加入终浓度为2mol/L的NaCl破坏核小体结构,加入不同量,不同来源的RNA,装透析袋,逐渐降低离子强度进行染色质重组,重组染色质中加入DNase I消化DNA,PCR扩增白蛋白基因的外显子1到外显子2约1200bp区段,PAGE电泳后,用银染色观察不同来源RNA促进NAase I对白蛋白基因的消化作用,不同组织来源(肝,肺,肾,脑)RNA对小鼠重组染色质中白蛋白基因DNase I消化敏感性均有促进作用,其中肝和肺RNA促进消化作用较强,酵母tRNA无显著促进消化作用,消化促进作用与NRA剂量有关,RNA能增加DNase I对白蛋白基因的消化敏感性且有组织(细胞)来源特异性,又委托丹麦(Chemical R D实验室合成2条与白蛋白基因互补的23核苷酸的RNA,用其进行重组试验,结果表明,重组混合物中含有低至0.2μg/mL的RNA,即可以发挥显著 的DNase I消化促进作用。