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枯草杆菌具有安全性好、产胞外蛋白、产品中不含内毒素等优点,是基因克隆的理想受体,但也存在某些外源基因不能表达、用鸟枪法克隆外源基因比较困难等缺点。若能构建可在大肠杆菌和枯草杆菌中复制和表达的双功能质粒作为载体,以大肠杆菌为中间寄主,利用其转化率高,克隆技术比较成熟的优点,先将DNA片段克隆至大肠杆菌,经过鉴定后再转至枯草杆菌中表达,则可克服枯草杆菌克隆
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