Non-structural protein NS1 of canine parvovirus induces the apoptosis of cells
犬细小病毒NS1 非结构蛋白可诱导细胞凋亡

摘要:【目的】研究犬细小病毒(Canine parvovirus，CPV) 非结构蛋白NS1在CPV引起宿主细胞凋亡中的作用，初步探讨CPV 引起细胞凋亡的机制。【方法】首先采用PCR 方法从犬细小病毒基因组中扩增NS1 编码基因，然后利用pcDNA3.1A 质粒构建NS1 真核表达载体pcDNA-NS1，并通过HEK293FT 细胞瞬时表达NS1重组蛋白，用Western-blot 检测以确定重组NS1蛋白能否在真核细胞中表达。然后用CPV感染和用pcDNANS1表达载体转染F81 宿主细胞，通过AnnexinV/PI 双染法检测磷脂酰丝氨酸外翻和通过化学发光法检测caspase-3/7活性，分析感染CPV或转染NS1基因对F81宿主细胞凋亡的影响。【结果】结果表明，本实验扩增的NS1 基因序列与GenBank 的序列一致，构建的表达载体结构正确，并能够介导NS1基因在真核细胞中表达。感染CPV 和转染NS1 基因均能诱导F81 细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻和明显提高细胞内caspase-3/7的活性，表明CPV 和NS1 蛋白均能引起细胞的凋亡。【结论】CPV 诱导宿主细胞凋亡与其编码的NS1 非结构蛋白有关。