Function of rmlB in the pathogenic Escherichia coli 44277(O2: k1)
大肠杆菌44277(O2: K1) 中rmlB 基因功能

摘要: 【目的】确定rmlB 基因在大肠杆菌( O2: K1) L-型鼠李糖合成中的作用。【方法】将基因rmlB 进行原核表达并测定酶活; 用同源重组的方法将rmlB 基因敲除，分析表型变化，并运用质谱，以及核磁共振等手段分析脂多糖O 侧链的结构，以确定rmlB 在O 抗原合成中的作用。【结果】成功对rmlB 基因进行了表达并测定了重组蛋白的酶活，确定蛋白RmlB 具有dTDP-D-glucose 4，6-dehydratase 活性。成功构建了rmlB 基因缺失突变株，对突变株进行表型分析发现突变株的表型与野生株相比无变化。对突变株分析发现突变株中的O抗原仍含有L-型鼠李糖，说明在该菌株中可能存在RmlB 的同功能酶或者存在其它的L-型鼠李糖合成途径。【结论】rmlB 基因编码的蛋白具有dTDP-D-glucose 4，6-dehydratase 活性但此基因对于L-型鼠李糖的合成不是必需的。