Isolation and function of genes regulating aphB expression in Vibrio cholerae
霍乱弧菌中调控aphB 的基因筛选及其功能

摘要:【目的】筛选霍乱弧菌C6706-中调控LysR 家族蛋白AphB 表达的基因。【方法】将霍乱弧菌埃尔托型菌株C6706－aphB 启动子区克隆到2 个报告质粒pBBRLux 和pKP302 上，并将其导入霍乱弧菌C6706－中，以此作为出发菌株。利用出发菌株与转座子pSC123 接合构建LZV630-302 转座子随机突变文库，通过测定化学发光强度检测aphB 启动子的表达水平，筛选aphB 表达受影响的突变株。利用随机PCR 方法检测转座子插入位点，并测序比对分析基因。【结果】从7 个转座子库中(共约4 万个突变株) 得到能影响aphB 表达(均导致下降)的2 株突变株T1 和T2。测序比对发现T1 中转座子插入在vc1585 读码框内，T2 中转座子插入在距vc1602 基因末端7 bp处。【结论】获得aphB 表达改变的突变株，基因vc1585 和vc1602 可能直接或间接影响aphB 表达，为进一步研究aphB 表达调控影响因素奠定了基础。