Construction and Immunization of a Attenuated Enterohemorrhagic Escherichia coli O157
出血性大肠杆菌O157基因缺失疫苗株的构建及其免疫

出血性大肠杆菌O157感染是重要的新发食物源性传染病，主要致病特征之一是能引起人肠上皮细胞特征性的A/E损伤，A/E损伤主要是由LEE致病岛所编码的毒力因子所引起，ler是LEE致病岛毒力基因群的中心调节基因，对LEE致病岛所编码的毒力因子有正调控作用。O157:H7另一个毒力因子是由整合到染色体上的原噬菌体编码的Stx毒素。以O157:H7 86-24为始发菌株，利用自杀性质粒pCVD442和同源重组的原理构建了O157:H7的ler基因缺失突变菌株（缺失了ler基因中第73-351位的碱基，共279bp），并利用噬菌体消除技术筛选到消除了编码Stx的原噬菌体DNA的菌株，构建出了O157:H7 ler/stx基因缺失突变弱毒菌株，并对该菌株的Vero细胞毒性、小鼠模型的安全性以及乳鼠的被动免疫保护作用进行了研究。结果表明，O157:H7 ler/stx基因缺失突变菌株丧失了对Vero细胞的毒性作用，并丧失了对实验小鼠的致病性，具有良好的安全性。乳鼠被动免疫保护性实验表明，用该菌株免疫母鼠后，乳鼠通过吸吮母乳可以获得良好的被动免疫保护作用。因此本研究所构建的O157:H7 ler/stx基因缺失突变弱毒菌株可作为预防EHEC O157:H7感染的疫苗候选株，为最终研究制出O157的基因工程菌苗奠定基础。