Burkholderia cepacia lipase gene modification and its constitutive and inducible expression in Pichia pastoris
洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶的基因改造及其在毕赤酵母中组成型和诱导型的表达

摘要:【目的】克隆洋葱伯克霍尔德菌（Burkholderia cepacia）脂肪酶基因，实现其在毕赤酵母中快速、安全和稳定性的大量表达。【方法】首先设计引物扩增B. cepacia脂肪酶基因，然后应用生物信息学方法分析B. cepacia和毕赤酵母整体密码子使用情况、脂肪酶基因信号肽及密码子偏好性。在此基础上，运用overlap PCR对脂肪酶基因中低使用频率密码子进行改造并同时降低基因的G+C含量，获得优化的脂肪酶基因。再分别把原始和优化的脂肪酶基因导入载体pGAPZα和pPIC9K中，获得组成型表达