Expression and bioactivity assay of mature chicken interleukin-18 protein mutant using Pichia pastoris expression system
鸡白介素18成熟蛋白突变体在毕赤酵母中的高效表达及其生物活性检测

摘要：【目的】通过目的基因克隆，表达获得高产量具有生物活性的鸡白介素18成熟蛋白(mature chicken interleukin-18, mChIL-18)。【方法】根据毕赤酵母密码子偏嗜性，通过引物设计来定点突变鸡白介素18基因，构建了重组质粒pPIC9K-mChIL-18。将线性化的重组阳性质粒电转到毕赤酵母GS115中，经筛选多拷贝阳性子后进行诱导表达。用MTT法和微量细胞病变抑制法检测其生物活性。【结果】筛选的多拷贝重组菌在诱导温度为28℃，培养液pH值为6.5，甲醇的诱导浓度为2%，诱导时