sRNA (sraB) regulate the resistant ability of Salmonella enterica serovar Enteritidis to egg albumen
非编码小RNA（sraB）调控肠炎型沙门菌的抗蛋清抑菌作用

摘要: 【目的】肠炎型沙门菌是一种食源性人畜共患病病原菌，可在禽蛋中存活并传播。sRNA为新近发现的基因表达调控分子，本实验以sRNA（sraB）为对象，探索sRNA与肠炎型沙门菌在禽蛋中存活的相关性，及研究其在细菌抵抗蛋清抑菌作用中的调控功能。【方法】参考已报道的沙门菌全基因组及sraB序列，设计并扩增sraB突变用基因片段，运用Red重组系统（red recombination system）对肠炎沙门菌野生株（SE2472）sraB基因进行定点敲除，构建出sraB敲除株（SE2472△sraB）。分析比较sraB敲除对沙门菌在蛋清中存活的影响；另构建表达sraB的回复表达质粒pHDB3-sraB，将其转入sraB敲除株构建回复株SE2472△sraB-comp，以回复表达sraB，分析sraB表达对沙门菌敲除株的回复作用；并分别以野生株、敲除株及回复株研究sraB在抵抗蛋清中几种抑菌因子（如溶菌酶和卵转铁蛋白）作用中可能的调控作用。【结果】敲除株在蛋清中存活率为野生型的61%－70%，回复株相比野生型的存活率比敲除株提高10%－33%；在转铁蛋白抑菌实验中，孵育8 h和24 h，敲除株的存活率分别为野生型存活率的 38%和23%，孵育8 h回复株相比野生型的存活率比敲除株提高15%，但孵育24 h回复株的存活率未见提高；在溶菌酶抑菌实验中，孵育8 h和24 h后，敲除株存活率分别为野生型的41%和27%，回复株相比野生型的存活率分别比敲除株提高35%和23%。【结论】通过比较sraB敲除与否，研究肠炎型沙门菌在禽蛋中的存活及对抑菌因子的抵抗作用，结果表明sraB在肠炎沙门菌抵抗蛋清抑菌作用中起着重要调控功能。