Characterization of Listonella anguillarum as the aetiological agent of vibriosis occurred in cultured ayu (Plecoglossus altivelis) in Ninghai country, China
宁海地区香鱼弧菌病病原菌鉴定

摘要：【目的】香鱼弧菌病对中国沿海地区的香鱼养殖业造成了巨大的危害，然而，病原不明导致了防治上的许多问题。本文鉴定了引起宁海地区香鱼爆发性弧菌病的病原。【方法】采用TCBS平板分离优势菌；采用回归感染试验确认病原菌，采用改进的寇氏法计算LD50；采用形态学观察、生理生化特征测定、细菌特异性引物PCR扩增检测及细菌16S rRNA和金属蛋白酶（MP）基因序列分析鉴定细菌；采用药敏实验测定它对部分抗生素的敏感性。【结果】分离并鉴定优势菌株ayu-H080701为宁海地区香鱼弧菌病的病原菌，它对香鱼的半致死量为1.2×104 CFU。形态学观察和生理生化特征测定表明，ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌最为接近。PCR扩增检测表明，细菌16S rRNA 基因通用引物和鳗利斯顿氏菌MP基因特异引物均能扩增到预期大小的特异性条带。ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌16S rRNA基因核苷酸序列同源性最高，为99.4%～99.5%，与同属的海弧菌和美人鱼发光杆菌分别为94.3%和91.9%；ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌MP氨基酸序列同源性高达97.6%～98.8 %，与其它弧菌科成员则低于75.6 %，系统进化树分析也揭示ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌进化相关性最高。【结论】引起宁海地区香鱼弧菌病的菌株ayu-H080701被鉴定为鳗利斯顿氏菌。