杂合抗菌肽CecA_mil的改造及在毕赤酵母中的分泌表达

参照毕赤氏巴斯德酵母（Pichia pastoris）偏好密码子，改造并化学合成杂合抗菌肽CecA_mil基因，改造后的CecA_mil基因克隆到pPICZα_A载体中，构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα_A_CM，转化Pichia pastoris受体菌X_33。在醇氧化酶(AOX)启动子调控下，分子量约1.9 kD的CecA_mil杂合抗菌肽获得表达，经表达条件优化，重组酵母菌的摇瓶发酵产率可达到245μg/mL。抗菌特性研究表明，该表达产物具有广谱抗菌活性，对多数G－菌及G＋菌均有较好的抑菌活性，特别是对氨苄青霉素抗性菌和卡那霉素抗性菌抑杀效果更好；具有热稳定性和酸稳定性。这些特点使得重组抗菌肽CecA_mil在食品防腐、疾病防治和动物饲料添加剂等方面显露出很好的应用前景。