Virulence comparison of genetic engineering virus containing different length poly(C) tract of foot-and-mouth disease virus
不同长度poly(C)对口蹄疫病毒基因工程毒的毒力影响

【目的】研究口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus，FMDV) poly(C)区段的序列长度与FMDV毒力之间的关系。【方法】首先利用NheⅠ/NotⅠ线化FMDV pGEM-XJ/AKT/69全长重组质粒，制备体外转录本，借助Lipofectamine 2000转染BHK-21细胞，获得基因工程毒。随后，在细胞传代过程中，收取不同代数病毒培养液，提取总RNA进行poly(C)的长度测定，并进行乳鼠致病性试验和BHK-21细胞TCID50的测定。【结果】我们发现，基因工程毒在BHK-21上连续传代至第6代时，可见明显的致细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)；在经过一代乳鼠接种之后再重新适应到BHK-21细胞的过程中，poly(C)区段出现了缩短现象；乳鼠致病性试验和BHK-21细胞TCID50测定结果表明，尽管基因工程毒与母本毒相比毒力偏低，但含有不同长度poly(C)的基因工程毒之间并无显著差异。【结论】poly(C)区段的序列长度在12~17个C之间改变对FMDV基因工程毒的毒力无明显的影响。