芽孢杆菌原生质体作为质粒DNA转化的受体

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) B3F 7658，短小芽孢杆菌(B. pumilus) AS 1.940，巨大芽孢杆菌(B．Megaterium) AS 1.941，和多粘芽孢杆菌(B. polymyxa) AS 1.878等菌株,既不能作为染色体DNA的转化受体，也不能作为质粒DNA的转化受体。用不同量的溶菌酶处理这些菌株形成原生质体，然后加pUB110质粒DNA，经聚乙二醇6000(PEG)诱导，在含新霉素(400μg／ml)的DM-3再生培养基上恢复细胞壁，培养48小时后，转化子数为1.0 x 103一4.6×105／μg DNA。若同时用PEG和Ca2+ 离子诱导，转化子数可提高2—3倍。质粒pUBll0用EcoRI酶切后，转化子数大大下降(2.0×102转化子／μg DNA)。Eco RI酶切后，用T4连接酶连成环状，转化子数有所增加(1．7×103转化子／μg DNA)。