Influence of Sequence Modification Flanking AUG Codon on Δ6-fatty Acid Desaturase Gene Expression
转译起始密码子周边序列的改变对Δ6-脂肪酸脱氢酶基因表达的影响

将少根根霉中Δ6-脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)的起始密码子周边序列作适当的修改，并把修改后获得的片段(RAD6_1)亚克隆到表达载体pYES2.0，构建重组表达载体pYRAD6_1。经测序验证，把pYRAD6_1转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达分析，同时以空载体pYES20和出发序列所构建的pYRAD6作为对照。通过气相色谱(GC)和气相色谱/质谱(GC_MS)分析表明，在pYRAD6和pYRAD6_1转化的酿酒酵母中生成γ_亚麻酸，而pYES2.0中没有检测到。其中，pYRAD6-1转化的酿酒酵母γ_亚麻酸表达量占细胞总脂肪酸含量的5.23%，而对照pYRAD6转化的酿酒酵母中表达量只占2.64%。