O139霍乱弧菌质粒基因组文库的建立及O抗原基因的筛选

合成O抗原的基因是串联在一起的一个基因簇，提取O139霍乱弧菌基因组DNA，限制性内切酶EcoRⅠ酶切，电泳回收4～20kb的DNA片段，构建质粒基因组文库。随机筛选重组克隆，获得一株可与O.139霍乱弧菌抗血清发生凝集反应的重组克隆，命名为大肠杆菌DH5α(pMG320)。经鉴定分析重组克隆所表达的O抗原具有良好的免疫原性及反应原性。酶切分析质粒pMG320，推知其O抗原基因大小约4.6kb。这为今后O.139霍乱疫苗的研制及O.139霍乱弧菌O抗原基因的结构和功能研究提供了条件。