棘孢曲霉SML22木聚糖酶系主要组分的纯化与性

经超滤浓缩、分子筛色谱、阴离子和阳离子交换层析，由棘孢曲霉发酵液最终分离得到4个电泳纯的木聚糖酶主要组分Xy-1、Xy-2、Xy-3和Xy-4。通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得各组分的分子量分别是92.13、32.40、42.40和27.03 kD。实验证明这些酶组分均属于酸性木聚糖酶，Xy-1、Xy-2、Xy-3和Xy-4的最适反应pH分别为5.0、4.0、4.6 和3～3.5。各酶组分在酸性条件下较稳定，碱性条件下酶活丧失较快。Xy-1及Xy-2的最适反应温度在75℃，在50℃以下比较稳定；Xy-3及Xy-4最适反应温度为55℃，在40℃以下比较稳定。通过对各酶组分米氏常数的测定可知，Xy-1及Xy-2对底物桦木木聚糖的Km值分别为0.36%和0.26%，Xy-3及Xy-4的Km值为2.46%和13.9%。4种组分的Vmax分别为4.01μmol/min/mg、8.81μmol/min/mg、81.97μmol/min/mg、4.71μmol/min/mg。Cu2+、Ag+对各组分都有较强的抑制作用， Mg2+、Ba2+、Ca2+能促进Xy-3的木聚糖酶活，Ca2+也可大幅度促进Xy-4的木聚糖酶活性。