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微生物学报 2004
Study on DNA Shuffling Method for Changing the Promoter Activity of aacC1 Gene
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Abstract:
从表达质粒pYPX251(GenBank 登陆号:AY178046)中获得aacC1基因启动子,采用DNA改组(DNA shuffling)技术在体外获得突变体。以lacZ作为报告基因,筛选获得活性明显改变的启动子。经过验证,对其中活性变化明显的7个启动子用邻硝基苯基β半乳糖苷(ONPG)作为底物进行表达活性测定。结果表明,获得的强启动子比原来的提高了3~8倍,而弱启动子则活性下降明显,其中3个几乎无活性。进一步对这7个启动子进行了序列分析。