Cloning,Expression and Animal Experiment of the Immunopotential Fragment of mrp Gene from Streptococcus suis type 2
猪链球菌2型mrp基因免疫功能片段的克隆、表达及动物试验

根据猪链球菌2型（Streptococcus suis type 2）国外分离株的溶菌酶释放蛋白（Muramidasereleased protein, MRP）的基因序列，设计并合成一对引物，利用PCR技术扩增了江苏分离株的开放阅读框298～827bp间529bp的基因片段，并定向克隆至pET32a(+)表达载体中。重组质粒经限制性酶切鉴定和测序，转化至大肠杆菌BL21，经IPTG诱导，可表达分子量约42kD的蛋白。经过镍亲和层析柱层析，获得纯化的重组蛋白。以重组蛋白免疫Balb/c小鼠，以5LD50猪链球菌强毒株攻击后小鼠的相对存活率达625%。证实所表达的MRP片段为重要的保护性抗原。