Development of one-step multiplex RT-PCR forsimultaneous detection of four potato viruses
马铃薯病毒一步法多重RT-PCR检测技术的构建

根据马铃薯病毒PVX、PVY、PVA、PLRV的CP基因序列设计4对特异性引物, 通过对试剂浓度和反应条件进行优化, 建立了能够同步检测PVX、PVY、PVA、PLRV的一步法多重RT-PCR检测方法。该方法对PVX、PVY、PVA、PLRV扩增出的靶带大小分别为732、422、132和336 bp, 凝胶电泳易辨别区分。病毒RNA最低检测限度为7.8 pg/μL, 对PVM、PVS、AMV、TMV及PSTVd的扩增为阴性。研究结果表明, 该方法特异、灵敏, 比两步法多重RT-PCR检测更加快速、简便、提高了检测效率, 降低检测成本, 为马铃薯病毒的高效检测提供了有效手段。