Effect of Overexpression of Bacillus subtilis Phosphoenolpyruvate Carboxykinase on Succinate Production in Escherichia coli
过量表达Bacillus subtilis磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶对大肠杆菌产琥珀酸的影响

在大肠杆菌厌氧混合酸发酵途径中, 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PCK)皆可催化由磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)到草酰乙酸(OAA)的反应。鉴于经由PCK催化的反应伴有ATP的生成, 理论上更有利于菌体生长和产酸, 本研究以大肠杆菌W3110 (△pfl, △ldh)为出发菌株, 利用λ-Red同源重组系统构建了其ppc缺陷菌株并在此基础上过量表达了Bacillus subtilis pck基因。初步的厌氧发酵实验表明: 过量表达pck可在一定程度上恢复初始菌株厌氧代谢葡萄糖的能力。其中又以ppc缺陷株更为明显, 其耗糖能力和产酸能力分别为对照菌株的4.2和15.3倍。