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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
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THE INFLUENCE OF DIFFERENT CULTURAL CONDITIONS ON EXPRESSION OF ScFv GENES AGAINST ALPHA-TOXIN OF CLOSTRIDIUM PERFRINGENS TYPE A
不同培养条件对抗α毒素ScFv基因表达的影响

Keywords: 产气荚膜梭菌α毒素,单链抗体,基因表达,中和活性

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Abstract:

将ScFv基因片段与pHOG21载体连接后,转化至受体菌XL1-Blue中,得到重组菌株XL1-Blue(pHOG2E3)。随后研究了培养基中无机盐成分、温度、诱导时间、IPTG和蔗糖浓度对ScFv基因表达的影响。经SDS-PAGE分析表明,重组菌株XL1-Blue(pHOG2E3)在LB培养基中加入0.5mmol/L IPTG和 0.4 mol/L蔗糖,37℃诱导6h,其目的蛋白的表达量较高,表达的ScFv蛋白主要以包含体的形式存在,分子量为31,000D,在重组菌株的培养上清和菌体裂解上清液中,通过E

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