The Influence of Autophagy on Apoptosis of Macrophage Induced by Salmonella typhimurium
自噬对鼠伤寒沙门菌所致的巨噬细胞凋亡的影响

为探讨鼠伤寒沙门菌与巨噬细胞共作用时细胞自噬对凋亡的影响, 用加入自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin, RAPA)和未加RAPA的RPMI 1640过夜培养小鼠腹腔巨噬细胞J774A.1, 以携带一分子量为100 kb毒力质粒的鼠伤寒沙门菌标准毒株SR-11为受试菌。首先测定RAPA对菌量及细胞活性的影响, 然后建立细胞感染模型, 在细菌与细胞共作用后动态观察24 h, 不同时间点检测细胞超微结构变化、自噬泡的形成、Beclin-1和Bcl-2的表达、细胞存活率和胞内活菌计数以及细胞凋亡情况。结果显示, RAPA单独作用于细菌或细胞时菌量及细胞活性均无变化; 而对细胞感染模型而言, RAPA作用与否细胞内的细菌数及细胞存活率均有显著改变, RAPA可明显降低细胞内活菌数及其所致的巨噬细胞凋亡率(P < 0.05); RAPA干预组在细菌与细胞共作用早期, 部分细菌可被双层膜包裹形成自噬泡, 细胞超微结构正常; Beclin-1的表达量增加, 而Bcl-2的表达量降低; 后期细胞破坏程度明显轻于未用RAPA组。以上结果提示, 通过调控细胞自噬水平以减轻宿主细胞凋亡, 可作为防治某些感染性疾病的新途径。