Identification and Characterizations of Streptococcus agalactiae Isolated from Tilapia Cultured in Guangdong and Hainan Provinces
广东与海南养殖罗非鱼无乳链球菌的分离、鉴定与特性分析

从中国广东、海南罗非鱼主养区发生爆发性疾病的多个养殖场的罗非鱼病鱼体上, 分离到多株致病菌株。人工感染试验显示分离菌株具有较强的致病力, 有多株经腹部注射分离细菌浓度为 1 × 106 CFU/mL时可使100%的受感染鱼死亡, 选择其中7株强毒株进行药物敏感性实验与鉴定。不同菌株对药物敏感性存在一定的差异但与菌株来源无相关性, 29种抗生素中对13种敏感、7种不敏感、9种存在菌株的差异。各分离菌株均为革兰氏阳性菌, 呈β溶血。采用链球菌快速鉴定系统ID 32 STREP、Lancefield分析及多项补充生理生化鉴定结果, 初步判断为无乳链球菌Streptococcus agalactiae。PCR扩增16S rRNA基因和GBS-specific gene cfb (CAMP factor)基因的全长序列, BLAST分析显示所有菌株的16S rRNA基因与GenBank上登录的无乳链球菌的相应序列高度同源 (> 99.8%), 各分离菌株间的16S rRNA基因序列也高度同源 (≥99.9%-100%)。各菌株cfb基因序列高度同源 (100%), BLAST显示与已知无乳链球菌的相应序列也具有高度同源性 (≥99.0%)。综合上述实验结果, 可判定广东与海南罗非鱼主养区2009年夏季发生的罗非鱼爆发性疾病的病原菌为无乳链球菌。