Expression of Rabies Virus Glycoprotein Gene in Saccharomyces cerevisiae
狂犬病病毒糖蛋白在酿酒酵母中的表达

利用酿酒酵母表达系统表达狂犬病病毒糖蛋白G, 可获得大量无致病的抗原, 为研究新型狂犬病疫苗提供条件。构建Tat-G融合基因, 通过EcoR I和Xba I酶切位点克隆至pYes2表达载体中, 醋酸锂法转化酿酒酵母, URA3筛选鉴定阳性克隆, 阳性重组子经半乳糖诱导20 h后, 提取蛋白, SDS-PAGE和Western blot分析鉴定融合蛋白。SDS-PAGE结果显示糖蛋白基因在酿酒酵母中可能表达为2种形式的蛋白, yGI和yGII, 分子大小分别为66 kD和56 kD, Western blot显示在56 kD处有特异性条带。结合前人的研究成果, 初步判断狂犬病病毒糖蛋白基因的跨膜TD区和膜内编码区对RV-G蛋白分子的正确折叠和免疫活性等有至关重要的影响, 从而为进一步提高yGII蛋白的表达奠定基础。