siRNA interference on VP15 gene of shrimp wssv
对虾白斑病毒VP15基因的RNA干扰体外研究

VP15是南美白对虾WSSV病毒的一个核衣壳基因。本研究采用体外干扰实验筛选对VP15具有针对性的siRNA。实验构建了真核表达载体pEGFP–VP15，并将设计的siRNA以及pEGFP–VP15共转染BHK细胞。采用Western blot方法检测GFP–VP15融合蛋白的表达，半定量RT-PCR方法检验siRNA抑制VP15基因转录的效果。 实验结果表明，pEGFP–VP15在PK细胞正常表达，设计的三对siRNA对GFP–VP15的mRNA转录均有不同程度的干扰效果，其中siRNA1的干扰效果最为显著。实验结果为下一步对虾体内干扰WSSV病毒复制研究以及筛选更多的特异siRNA建立基础。