Expression and characterization of the dermonecrotic toxin gene of Bordetella bronchiseptica
支气管败血波氏杆菌皮肤坏死毒素的重组表达及其生物学特性

皮肤坏死毒素 (DNT) 是支气管败血波氏杆菌的主要致病因子之一。通过PCR分段扩增和克隆获得了全长4 356 bp的dnt基因，并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western blotting检测结果表明，表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化试剂盒纯化后，得到纯度为93.2％的融合蛋白His6-DNT。在乳鼠皮肤坏死试验中，表达产物His6-DNT和天然DNT均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中，兔抗His6-DNT血清能中和天然DNT使其失去对乳鼠的皮肤坏死毒性。试验结果表明，重组蛋白具有天然DNT的生物学毒性和免疫原性，所产生的抗体具有中和活性。文中所获得的重组DNT蛋白具有良好的生物学活性，为DNT的结构和功能研究奠定基础。