THE FABRICATION AND OPTIMIZATION OF cDNA ARRAYS ON THE GLASS SURFACE
玻璃表面cDNA微阵列的制备与优化

对DNA进行荧光标记，确定简单、实用和有效的固定化方法和筛选出合适的杂交条件，是制备DNA阵列的几个关键步骤。在PCR的过程对cDNA进行标记，不同的掺入比例可以得到不同的标记效率，Cye dye-dCTP/dCTP的比例在1：3－1：4较好。将DNA固定到玻璃表面，poly-1-lysine方法是一种不需要对DNA进行修饰的有效方法，其中UV照射的能量以600mJ效果最好；水合（rehydrate）温浴过程的温度以65℃最佳，在固化过程中所用探针的浓度0.2-0.5mg/ml对杂交信号影响不多，也就是芯片表面固定的探讨DNA应选在此范围内，杂交信号与所用的靶DNA的浓度成正相关，且有一定的范围内呈正比例关系。