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生物工程学报 2013
Synthesis of cefatrizine by recombinant a-amino acid ester hydrolase
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Abstract:
为了探索酶法合成头孢曲嗪的产业化工艺路线,从红纹黄单胞菌Xanthomonas rubrillineans中克隆a-氨基酸酯水解酶基因全序列,转化入大肠杆菌中表达。以头孢曲嗪的合成转化率为指标,分别考察纯化的重组a-氨基酸酯水解酶合成头孢曲嗪的最适温度、最适pH和最佳底物摩尔比。经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,重组a-氨基酸酯水解酶的单体分子量为70 kDa。催化合成头孢曲嗪的最适pH为 (6.0±0.1),最适温度为36 ℃。底物浓度约为7-ATTC 30 mmol/L、HPGM×HCl 120 mmol/L,酶用量22 U/mL时,头孢曲嗪的转化率达到64.3%。结果为优化酶法合成头孢曲嗪的产业化工艺奠定了基础。