Nuclear localization of oligonucleotides decoy effect on nuclear factor-κB activity
人工诱骗子的入核分布对核因子-κB活性的调控作用

探讨了由核定位信号 (NLS) 多肽介导的核因子-κB (NF-κB) 寡核苷酸诱骗子 (ODNs decoy) 进入HeLa细胞核的效率，以及对细胞核内NF-κB活性的调控作用。利用双功能交联剂 (Sulfo-SMCC) 共价交联末端氨基修饰的ODNs decoy和末端巯基修饰的NLS多肽，形成NLS多肽共价连接的ODNs decoy。依靠TransME 转染试剂的辅助转染NLS-ODNs decoy进入HeLa细胞，用荧光显微镜观察荧光标记的NLS-ODNs 在细胞内的分布。用MTT法检测HeLa细胞的活力，以凝胶迁移实验 (EMSA) 检测TNF-α诱导的HeLa细胞核抽提物中NF-κB的活性。结果表明，NLS多肽成功地连接到ODNs decoy上，NLS-ODNs可高效入核，入核率达到17.9％。转染NLS-ODNs进入HeLa细胞，对细胞活力无明显影响，而显著抑制核内NF-κB的活性。结果表明NLS多肽可提高ODNs decoy的入核效率，显著增强诱骗子对NF-κB活性的抑制效果。