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生物工程学报 2013
Improved fluorescence spectrometric determination of lipid content in Botryococcus braunii
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Abstract:
布朗葡萄藻是一种含脂量高、开发潜力大的能源微藻,但因其细胞呈集落态且胞壁较坚厚,应用传统的尼罗红荧光光谱法测定其脂质含量时,通常因灵敏度低、重复性差而难以获得可靠结果。本研究通过超声波分散集落、二甲基亚砜辅助尼罗红进入细胞、优化染色条件,有效地解决了上述问题。具体方法为:藻液先经频率为20 kHz、发射功率为100 W的超声波按1 s/1 s (开/关) 间歇处理20 s使细胞分散,而后依次加入与藻液等体积的15%二甲基亚砜溶液和3 μg/mL尼罗红溶液,充分混匀后于黑暗中40 ℃染色10 min,再于490 nm激发光下进行荧光光谱检测。上述改进方法与传统方法相比,检测灵敏度提高了196.6%,反映检测重复性的相对标准偏差 (RSD) 由10.91%降至1.84%。该方法为布朗葡萄藻育种与培养等研究提供了快速、灵敏的脂质含量检测技术。