Effect of ascorbic acid, epidermal growth factor and follicle stimulating hormone on in vitro culture of sheep ovarian cortical tissue
抗坏血酸、表皮生长因子和促卵泡素对绵羊卵巢皮质体外培养的影响

本研究旨在评估抗坏血酸 (VC)、表皮生长因子 (EGF)、促卵泡素 (FSH) 对绵羊原始卵泡体外培养的影响以及它们之间的相互关系。实验按照2×2×2因子试验设计分为8组，分别为：MEM(对照组)，MEM+VC (50 μg/mL)，MEM+EGF (100 ng/mL)，MEM+FSH (50 ng/mL)，MEM+VC+EGF，MEM+VC+FSH，MEM+EGF+FSH，MEM+VC+ EGF+FSH。在培养0 (未培养对照组)、2、6、12 d后，对培养的卵巢皮质薄片进行组织学和增殖细胞核抗原 (PCNA) 检测以及透射电镜 (TEM) 观察。结果表明，与未培养组 (发育卵泡比例15.4％±1.9％，正常卵泡比例88.2％±4.6％) 比较，所有培养组中发育卵泡比例显著增加(P＜0.05)，正常卵泡比例下降(P＜0.05)。培养12 d后，与对照组 (卵泡直径 (34.5±3.3) μm，卵泡存活比例 (38.9％±3.9％)) 比较，MEM+VC+FSH和MEM+EGF+FSH组中卵泡直径 (分别为(39.7±3.4) μm和 (42.5±5.1) μm) 和卵泡存活比例 (分别为58.5％±4.3％和59.3％±3.7％) 都显著提高 (P＜0.05)；各处理组中，培养12 d后，MEM+VC+EGF组中发育卵泡比例 (49.3％±3.2％) 和卵泡直径 ((32.3±2.3) μm) 最低，颗粒细胞PCNA阳性卵泡比例 (26.4％±1.2％) 也最少，而MEM+VC+EGF+FSH组中卵泡存活率 (59.7％±6.1％) 和卵泡直径 ((42.5±5.1) μm) 都显著增加 (P＜0.05)，颗粒细胞PCNA (43.5％±4.1％，P＜0.05) 表达增加。电镜结果表明，VC+EGF+FSH组能够维持与正常卵泡类似的超微结构，而在MEM 和MEM+VC+EGF组却显示不同程度的退化特征。本研究结果提示在培养中联合添加VC与EGF抑制卵泡的发育和生长，而联合添加VC、EGF和FSH可能是促进绵羊原始卵泡体外激活和生长，维持卵泡存活以及结构完整的最有效的处理手段之一。