Induction of CYP2E1 activity in Ctenopharyngodon idellus hepatocyte
草鱼肝细胞中CYP2E1活性的诱导研究

CYP2E1为代谢大部分药物及环境巾毒物的关键酶。以草鱼肝细胞（Ctenopharyngodon idellus hepatocyte）为反应体系，选取氯唑沙宗（CZX）为底物，采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定其产物6-OH-氯唑沙宗（HCZX）的量，Lowry法测定肝细胞巾蛋白的浓度从而反映CYP2E1活性，并采用该酶特异性诱导剂乙醇对其进行诱导，观察其酶活变化及CZX在细胞中代谢情况。结果表明，CZX在草鱼肝细胞中的基础代谢较低，经过对CYP2E1诱导条件的优化及筛选，得到最佳诱导剂剂量为4μg／mL、诱导时间为24h、底物浓度为50μg／mL并且孵育时间为1h时，其酶活达到最高，约为0．47μg／min·mg。对照组和诱导组的草鱼肝细胞中CZX的消除半衰期（t。）分别为202．10h和28．75h，差异极显著，表明乙醇诱导的CYP2E1能够加快底物的代谢。酶促反应动力学参数表明乙醇诱导的CYP2E1与底物的亲和力较高，酶促反应强度较大。该结果能够为CYP2E1代谢的药物及环境毒物的研究提供理论依据。