Secreted Expression of Bacillus pumilus Xylanase Gene in Pichia pastoris and Study on Enzymatic Properties
短小芽孢杆菌木聚糖酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及酶学性质研究

将短小芽孢杆菌HB030的内切-1,4-木聚糖酶基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9k上，得到重组质粒pHBM220，将pHBM220经酶切后分别转化三株毕赤酵母KM71、GS115、SMD1168，该木聚糖酶基因在三株毕赤酵母中均实现了分泌表达。将重组毕赤酵母KM71(pHBM220)、GS115(pHBM220)、SMD1168(pHBM220)分别诱导产酶，对重组酶进行相关的酶学性质分析表明，三者的最适反应pH值约为5.5，最适反应温度约为60℃。在其最适反应条件下测得三者粗酶液酶活分别为10.80IU/mL，11.63IU/mL，9.68IU/mL。重组毕赤酵母KM71(pHBM220)所产酶的热稳定性较好，而在pH稳定性方面三者没有太大的差异。