人白细胞介素11 cDNA的克隆、融合表达及活性测定

取人胎肺做原代培养细胞，PMA诱导后，利用RT-PCR技术，扩增出了去掉N端信号肽序列的IL-11cDNA；经序列分析表明，该序列与文献报道序列高度同源，仅3个核苷酸有变化，氨基酸序列完全一致。将此IL\|11cDNA克隆入硫氧还蛋白基因融合表达载体pTRXFUS的trxA基因3′末端，利用其3′端的蛋白肠激酶切点，构建符合读码框的融合基因。该融合蛋白在大肠杆菌中表达量达20%以上。用IL-6依赖细胞株7TD1及MTT法测定生物学活性，达2.56×105 u/mL菌液，对融合蛋白进行了Western blot测定，并对表达条件作了初步研究。