人肿瘤坏死因子衍生物b cDNA的构建与表达

构建了人肿瘤坏死因子缺失1～7位和102～107位共13个氨基酸编码序列的cDNA，即人肿瘤坏死因子衍生物b(rhTNFαDb)，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导后，目的蛋白的表达量占菌体总蛋白量的30%～60％。其中可溶性rhTNFα Db蛋白约占超声上清总蛋白的40%。经柱层析纯化后，目的蛋白纯度达95%以上。以L929细胞株检测rhTNFα Db的细胞毒活性，测得rhTNFα Db的比活性为2×108IU/mg。较rhTNFα 原型提高一个数量级。rhTNFα Db的体内外抑瘤试验也取得了初步结果