Expression of Human Interleukin 12(hIL 12) in Insect Cells
人白细胞介素12在昆虫细胞中的表达

人白细胞介素12(hIL-12)是一种异源二聚体细胞因子，由p40和p35两个亚基通过二硫键连接而成。首先构建了两个表达载体pVL1392-hp40和pVL1393-hp35，并分别与线性化多角体病毒基因组DNA共转染昆虫细胞株Sf9，用目视法筛选出重组病毒AcNPV-hp40和AcNPV-hp35。利用PHA激活的人淋巴细胞增殖试验，在条件培液中检测到重组hIL-12的生物活性，表达量约为1.5～2μg/106细胞。经实时BIA和Northern blot分析，hp35和hp40两亚基在昆虫细胞中获得表达。非还原条件下的Westernblot结果显示，重组hIL-12的表观分子量为76kDa，hp40同源二聚体的表观分子量为92kDa。重组ph40具有明显抑制hIL-12生物活性的作用。