α－天冬氨酰二肽酶基因的高表达和产物回收

建了α－天冬氨酰二肽酶基因(pepE)与载体pBV220连接的高表达重组质粒(pBVPEP，4337bp)。转化大肠杆菌后，目的基因表达为两种形式的产物，即细胞质中可溶性蛋白(～75％)和包含体蛋白，共占细菌总蛋白的30％左右。SDS－PAGE分析温敏诱导的表达蛋白，可以观察到约27kDa的高表达蛋白条带，与提纯的酶带一致。用不同于以往的萃取包含体蛋白的方法，回收了包含体中95％以上的表达蛋白。