在大肠杆菌中高效表达重组Protein A

本文构建了高效表达质粒pPA-3，其在大肠杆菌中表达的重组Frotein A仅含天然Prot—ein A的免疫球蛋白Fc段结台区，表达量达菌体可溶蛋白的20％。sDs—PAGE及western—b1ot结果显示，重组protein A的分子量有4种，即33、32．2，29．5和28．6kDa，其中33kDa与理论计算结果一致，推测其它分子量可能是由于胞内蛋白酶降解所致。一步亲和层析即可将重组Protein A从细胞裂解上清液中纯化出来。火箭电泳及酶联免疫分析结果表明，等蛋白量的该重组Protein A比天然Protein A能结台更多的免疫球蛋白。