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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
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Fusion and Expression of the Gene Encoding Human Mn-SOD to Anti-CEA Single-chain antibody in Escherichia coli
Mn-SOD与抗癌胚抗原单链抗体基因的融合及高效表达

Keywords: Mn-SOD
癌胚抗原,单链抗体,Mn-SOD,融合表达

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Abstract:

将Mn-SOD与抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因(ScFv gene)融合,重组到含T7启动子的表达载体pET-22b(+)中,构建表达质粒pETMnSOD-ScFv,并转化大肠杆菌BL21(DE3),进行高效表达,表达物占菌体可溶性总蛋白的24%。SDSPAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物分子量为45kD与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为分泌型表达有利于纯化。RIA测定表明表达产物能特异性的与抗原CEA结合,同时邻苯三酚法测定也表明表达产物具有SOD酶的活性,该融合蛋白为分泌CEA肿瘤的靶向性治疗提供新的途径。

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