谷氨酸棒杆菌质粒pXZ10145自发缺失突变体的特性及其重组质粒的构建

用谷氨酸棒杆菌质粒pxz10145转化钝齿棒杆菌T 6—13原生质体，得到自发缺失突变体pNAT65，该质粒为2．4kb，仍带有氯霉素抗性，经物理图谱分析表明，质粒pxz10145smaⅠ到claⅠ位点之间的片段已缺失，仍保留EcoRⅠ、XbaⅠ、BclⅠ三个酶的单切点。质粒pNAT65与pBR322用EcoRⅠ酶切连接得到重组质粒pNAR67，这一质粒在E．Coli中复制并表现Ap， Tc抗性，但氯霉素抗性能力大大降低，只能抗2μg／ml。