紫云英根瘤菌胞外多糖缺陷型变种的分离及遗传分析

经转座子Tn5诱变，获得20株紫云英根瘤菌菌株109胞外多糖(Exopolysaccharide，EPS)缺陷型(Eps-deficient，Exo-)变种。这些变种仍都是原养型，在含不同的碳底物或不同浓度碳底物的固体培养基上，菌落型态均无改变。与亲本菌相比，变种的EPS产量明显降低。所有变种未能在其宿主植物紫云英上结瘤。利用载体质粒pMN2，经Exo-变种与大肠杆菌受体菌交配，通过选择Tn5卡那霉素抗性标记的转移，构建成带有Tn5及菌株109多糖基因DNA片段的R－prime质粒。R-prime质粒能稳定地存在于菌株109中。大部分变种的Exc-表型能被R-prime质粒互补，但R-prime质粒未能使这些Exo-变种恢复有效结瘤的共生能力。根据互补结果，20株Exo-变种分为6种不同的互补群，其中5种互补群的多糖位点在遗传上是连锁的。