苏云金芽孢杆菌δ－内毒素crylA?基因在大肠杆菌和变铅青链霉菌中表达

利用合成的寡聚核苷酸片段，从质粒pOS1000中分离出具有适合克隆位点的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis )δ－内毒索crylA?全长基因。将该基因与大肠杆菌表达载体pKK223-3重组，并引入大肠杆菌JMl09中，经IPTG诱导．获得了超量表达的CryIA?蛋白。将crylA?全长基因插入链霉菌表达载体pHZl272中，得到重组质粒pHZl256，将该质粒引入变铅青链霉菌(Streptomyces　lividans)JT46中，经硫链丝菌素诱导．通过Westerablotting测定表明，重组变铅青链霉菌JT46(pHZl256)已表达出相应的CrylA?蛋白。杀虫试验表明，大肠杆菌和链霉菌所表达出的δ－内毒索crylA?对小菜蛾均有毒杀作用，其致死率分别为93％和57％。